在常规三代试管婴儿流程中，囊胚活检通常是在新鲜囊胚发育至第5或第6天时进行，通过活检针提取5–10个滋养外胚层细胞用于遗传学检测，之后将活检后的囊胚采用玻璃化冷冻技术保存于液氮中，以待检测结果。

这一过程中，囊胚仅经历一次玻璃化冷冻与解冻。然而，部分患者由于各种原因需先将第5–6天囊胚进行冷冻保存，待日后解冻再进行活检。这就引出一个重要问题：此类先冷冻再复苏后活检的操作是否会对胚胎发育潜能产生影响？

活检后需再次冷冻保存并进行第二次复苏，是否可能影响胚胎存活率、着床能力及后续妊娠结局？

活检率降低：胚胎的“承受力”有限研究表明，冷冻囊胚复苏后活检的第一个明显影响是可活检率下降。虽然现代玻璃化冷冻技术非常成熟，囊胚解冻后的复苏率高达98%以上，但并非所有复苏囊胚都适合立即进行活检。

活检操作需要囊胚重新扩张并达到一定标准，例如囊腔充分膨胀、细胞结构清晰，否则无法安全有效地取样。数据显示，冷冻复苏后的囊胚中，只有约70.5%能够再次扩张到符合活检要求。

这意味着近三成的胚胎可能因复苏后状态不理想而无法进行活检。相比之下，新鲜囊胚通常有更高的可活检率。

经历“二次冷冻”的影响解冻后活检囊胚经历一次活检两次冷冻，现有文献对这类操作的风险评估确实存在一定分歧。

一项汇总了多项研究的数据分析发现，在涉及二次玻璃化冷冻的22项研究中，13项研究报道称经历两次冷冻保存的胚胎在生物学或临床结局方面未出现负面影响；

相反，有6项研究报道二次冷冻胚胎临床结局受损，与未经历重复操作的胚胎相比，经历二次冷冻的囊胚活产率下降了约22%，同时会增加患者的流产率。

其余3项研究显示临床结局虽降低但仍可接受。

文献报道均显示解冻后活检不会增加患者不良妊娠结局，新生儿的早产率、畸形率以及低出生体重儿比例均未显著增加。

基于现有研究证据，囊胚在解冻后进行活检操作，可能会降低其成功完成活检的可能性，并对其后续发育潜能产生不利影响；

不过，该类操作并未显示出会增加新生儿出生缺陷或其他不良妊娠结局的风险。

因此，除非在特殊情况下确有必要，一般不建议患者选择对冷冻复苏后的囊胚进行活检。